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想知道液相色谱柱在选用前都需要了解些什么吗?
发布时间:2019-09-24   点击次数:57次
   液相色谱柱基于熔融核技术,性能超越传统全孔5μm和3μm色谱柱,在不增加柱压的情况下,实现快速高效分离,可作为传统5μm色谱柱的新型标准柱。
 
  液相色谱柱的性能特点:
  1、可使用100%水系流动相,柱内不会出现坍塌现象;
  2、适合于分离亲水性化合物;
  3、与常规ODS不同的选择性,加强极性化合物的保留,适合于分离纯化肽类和生物分子;
  4、酸性环境下比普通ODS柱具有更长使用寿命。
 
  在选择液相色谱柱之前,先多了解自己的样品和杂质,他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。
  1、样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测,即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。
  2、如果样品极性太强,或酸性太强;可以选择CN,NH2,或硅胶柱,HILIC(亲水色谱),也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱(缺点是离子对试剂平衡时间长,对流动相pH要求比较精密,否则很难重复实验,另外离子对试剂很难洗下来,基本上用了离子对的色谱柱就不能再用于其它实验)
  3、若样品是碱性的;可选择高纯硅胶柱(高纯硅胶缺少金属杂质,且硅胶端基封尾)或一些经过修饰的C18柱(如极性嵌入技术或碱去活技术等),他们都会减少碱性化合物的拖尾,一般会选择中性或偏碱的条件下做,因为这样可增加碱性样品的保留。
  4、如果碱性化合物的极性太强,或碱性太强;可以选择宽pH的C18色谱柱在高pH值检测(优点是方法开发简单,缺点是目前实现这一技术的色谱柱品牌比较少,价格也高)或者选用HILIC色谱柱(硅胶柱在反相条件下使用,这也是很经典的检测碱性样品的方法)选择强离子交换柱(缺点是不能用来分析其它样品,对流动相pH要求比较精密,否则很难重复实验)也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱。

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